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以三維立體長期骨髓培養(yǎng)進(jìn)行基質(zhì)細(xì)胞的功能性分析

基質(zhì)細(xì)胞,有別于造血細(xì)胞,為骨髓微環(huán)境中的必要組成,并且是長期維持生物體內(nèi)造血干細(xì)胞所不可或缺的。先前的研究指出,基質(zhì)細(xì)胞藉由產(chǎn)生造血調(diào)節(jié)因子與胞外基質(zhì),以及藉由調(diào)控細(xì)胞間的物理性接觸和黏合分子與細(xì)縫連結(jié)為基礎(chǔ)的細(xì)胞間訊息傳導(dǎo)來控制造血細(xì)胞的生長及分化。然而,大多數(shù)關(guān)于基質(zhì)細(xì)胞調(diào)控造血細(xì)胞生長及自我更新能力的研究都是利用平面骨髓培養(yǎng)系統(tǒng)所進(jìn)行的,而且大部分的結(jié)果顯示培養(yǎng)四至八周后,造血細(xì)胞即會開始減少。

Hirabayashi與來自日本大學(xué)醫(yī)學(xué)院、大阪府立大學(xué)與挪威科技大學(xué)的共同研究者們,于2011年11月的《實驗生物與醫(yī)學(xué)》期刊中發(fā)表了立體骨髓培養(yǎng)系統(tǒng)的論文。正如同文章的共同作者Isao Tsuboi所述:「平面骨髓培養(yǎng)系統(tǒng)無法長期培養(yǎng)造血細(xì)胞,因此無法用來進(jìn)行基質(zhì)細(xì)胞的功能性研究。所以,我們發(fā)展了三維立體的骨髓培養(yǎng)系統(tǒng),并且可以成功地長期培養(yǎng)造血細(xì)胞」

 

 

此一新型態(tài)的立體培養(yǎng)系統(tǒng)由特殊的粒子所構(gòu)成。論文的同作者Yukio Hirabayashi解釋:「此一由接合環(huán)氧樹脂所組成聚合物粒子為立體骨髓培養(yǎng)系統(tǒng)中最重要的一部分。我們由二十多種具有不同接合聚合物鏈長度、表面密度、聚合物網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)以及接合聚合物側(cè)鏈的粒子中,選出了最適合用于細(xì)胞培養(yǎng)的一種,我們將其命名為G-02。」另一位共同作者Tomonori Harada亦指出:「除了老鼠纖維母細(xì)胞株(MS-5 cell)外,表皮細(xì)胞株(HeLa cell)、骨源母細(xì)胞株(MC3T3E1 cell)與軟骨細(xì)胞株(ch-8 cell)皆可附著于G-02粒子并于其表面上快速生長。此一優(yōu)勢使的我們可以將G-02粒子用于三維立體骨髓培養(yǎng)系統(tǒng),亦可應(yīng)用于中央神經(jīng)系統(tǒng)、心臟與肝臟的立體組織培養(yǎng)。

CD34是一個廣為人知的人類造血先驅(qū)細(xì)胞表面標(biāo)志分子,不過帶有CD34分子的細(xì)胞亦可分化成基質(zhì)細(xì)胞。因此,當(dāng)帶有CD34標(biāo)志分子的細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)時,對于事先建立的基質(zhì)細(xì)胞層的功能將十分難以厘清?;|(zhì)細(xì)胞研究專家Shin Aizawa教授指出:「于此研究中我們利用老鼠基質(zhì)細(xì)胞株(MS-5)而非人類的基質(zhì)細(xì)胞,因此可以排除帶有CD34標(biāo)志分子的基質(zhì)細(xì)胞所造成的影響。此一共培養(yǎng)系統(tǒng)使的我們可以清楚的區(qū)分MS-5基質(zhì)細(xì)胞層與帶有CD34基質(zhì)細(xì)胞的功能。我們的研究團(tuán)隊正利用具有特異性的引子與探針來研究多種人類與老鼠細(xì)胞生長素在基質(zhì)細(xì)胞中的基因表現(xiàn)。

《實驗生物與醫(yī)學(xué)》期刊主編Steven R. Goodman博士指出,由Hirabayashi與共同作者們所發(fā)展的立體骨髓培養(yǎng)系統(tǒng)為基質(zhì)細(xì)胞功能性研究中的杰出且影響深遠(yuǎn)的工具。

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